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                補體介導的細胞毒試驗

                發(fā)布時間: 2021-11-01  點擊次數: 991次
                材料與儀器

                小鼠
                Hank's液 抗小鼠Thy-1的單克隆抗體 補體 伊紅-Y染液
                解剖器械 平皿 不銹鋼網 試管 吸量管 尖吸管 載玻片 蓋玻片

                實驗步驟

                1.  小鼠胸腺細胞懸液的制備
                 

                將 4~6 周齡小鼠采用頸椎脫臼法處死,取出胸腺放入已加入約4 ml冷Hank's液的平皿中,在100 目的不銹鋼網上研磨后,過篩,放入試管,離心1000 rpm,5 分鐘,用Hank’s液洗兩次。將沉淀的細胞重懸于Hank's液中,配成1×107 /ml細胞懸液。
                 
                2.  取試管3 支,標明順序,依據下表依次加入1×107 /ml胸腺細胞懸液、抗小鼠Thy-1 的單克隆抗體(最適稀釋度)及Hank's液,放入37 ℃水浴30 分鐘。



                3.  取出后每管加入1 %伊紅-Y 染液1 滴,混勻,室溫放置2 分鐘。
                 
                4.  重新混勻后分別在一張載玻片上滴片,加蓋玻片鏡檢。先在低倍鏡下觀察,再用高倍鏡觀察,比較3 管中細胞死活情況。



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