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                電解質(zhì)梯度測序膠 簡介

                發(fā)布時(shí)間: 2021-12-15  點(diǎn)擊次數(shù): 968次

                原理

                通過簡單地提高下槽緩沖液的鹽濃度,使凝膠底部的離子強(qiáng)度得以提高,在電泳過程中,鹽離子可以電泳進(jìn)入凝膠并產(chǎn)生重復(fù)性好的及有效的梯度。

                材料與儀器

                DNA
                TBE 乙酸鈉
                電泳儀

                步驟

                 

                1.  按基本方案步驟1~22灌制凝膠及進(jìn)行預(yù)電泳,但上槽緩沖液為0.5×TBE,下槽為1×TBE。

                2.  按基本方案步驟23~26步準(zhǔn)備樣品及加樣。
                 
                3.  如需測≤400堿基的序列信息,加入3 mol/l 乙酸鈉于下槽緩沖液至終濃度1 mol/l, 執(zhí)行步驟5。
                 
                4.  如果需測大于400堿基的序列信息,先按步驟5進(jìn)行,電泳2~3 h,然后加入3 mol/l 乙酸鈉于下槽至終濃度為1 mol/l。 

                5.  在60 W 恒功率下電泳。

                6.  進(jìn)行基本方案步驟23~33。
                 

                 

                同實(shí)驗(yàn)其他方法

                變性凝膠電泳實(shí)驗(yàn)

                1.  制作每塊凝膠時(shí),首先要用肥皂及水小心嚴(yán)格地清洗兩塊30 cm&times;40 cm的前后玻璃平板,用去離子水沖洗后晾干,用噴射洗瓶噴10%乙酵或異丙醇使平板濕海。 2.  然后用Kimwi

                含甲酰胺的測序膠

                1.  按基本方案步驟1~5組裝凝膠平板夾層。   2.  按所需濃度配制甲酰胺凝膠溶液,加熱輕輕挽拌使之溶解,冷卻至30℃以下。 3.  加入0.15 ml TEMED

                緩沖液梯度測序膠

                1.  按基本方案步驟1~5組裝凝膠平板夾層。   2.  在2個(gè)100 ml 燒杯中,配制緩沖液梯度凝膠溶液:50 ml 用0.5×TBE配制,25 ml 用2.5×TBE配制

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                安培生物科技有限公司介紹:

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