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                斑點濾膜結(jié)合法

                發(fā)布時間: 2022-03-14  點擊次數(shù): 923次


                原理


                材料與儀器


                待測蛋白質(zhì)樣品
                10%三氯醋酸(TCA) 考馬斯亮藍(lán)凝膠染色液 考馬斯亮藍(lán)凝膠脫色液
                Whatman 3 MM 濾紙


                步驟



                1. 用鉛筆在 3 mm 濾紙上畫出 1 cm x 1 cm 大小的方格;


                2. 在每一方格中心加入 3 ul 樣品;


                3. 將濾紙涼干,大約需要 15 min;


                4. 將濾紙浸入 10% TCA 溶液中 30 s(TCA 溶液可重復(fù)使用);


                5. 用水快速漂洗濾紙;


                6. 將濾紙浸入考馬斯亮藍(lán)凝膠染液中 30 s(染液可重復(fù)使用);


                7. 用水快速漂洗濾紙;


                8. 在考馬斯亮藍(lán)凝膠脫色液中使濾紙脫色,脫色在幾分鐘之內(nèi)完成;


                9. 通過相應(yīng)顯藍(lán)色的方格,可判斷其含有一定量的蛋白質(zhì)存在。



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