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              • 技術(shù)文章ARTICLE

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                染料攝取法測(cè)定細(xì)胞生存力實(shí)驗(yàn)

                發(fā)布時(shí)間: 2022-12-13  點(diǎn)擊次數(shù): 942次

                原理

                細(xì)胞懸液用碘化丙啶和二乙酰熒光素的混合液染色,用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

                材料與儀器


                步驟


                材料

                無菌

                單細(xì)胞懸液
                雙醋酸熒光素,10ug/ml,溶于 HBSS
                碘化丙啶,500ug/ml

                非滅菌

                熒光顯微鏡
                濾光片
                熒光素:激發(fā) 450/590 nm ,發(fā)射 LP 515 nm
                碘化丙啶:激發(fā) 488nm ,發(fā)射 615 nm

                操作步驟

                1. 細(xì)胞懸液的制備與染料排斥法相同(見方案 22.1),但是生長(zhǎng)液中不含酚紅。
                2. 以 1 : 10 的比例加入熒光素染料混合液,二乙酰熒光素的終濃度為 l ug/ml,碘化丙啶的終濃度為 50ug/ml。 :
                3. 將細(xì)胞置于 37°C , 溫育 10 min。
                4. 將一滴細(xì)胞滴在載玻片上,蓋上蓋玻片,用熒光顯微鏡觀察。


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